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人14-3-3蛋白eta(YWHAH)elisa試劑盒

人14-3-3蛋白eta(YWHAH)elisa試劑盒
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  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2023-03-20
  • 訪  問(wèn)  量:611
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產(chǎn)品詳情
品牌其他品牌貨號(hào)RQ-sw14606
規(guī)格96T/48T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研試驗(yàn)品牌瑞清
運(yùn)輸順豐包郵檢測(cè)種屬人,小鼠,大鼠,植物,魚(yú),蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細(xì)胞,土壤等動(dòng)植物
售后專(zhuān)屬服務(wù)可售地全國(guó)

人14-3-3蛋白eta(YWHAH)elisa試劑盒

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規(guī)格:96T/48T

包裝:盒

檢測(cè)原理:采用雙抗夾心法

保質(zhì)期:六個(gè)月

產(chǎn)品保存條件:2-8°C

應(yīng)用范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)使用

樣品形式:血清/血漿/組織勻漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體(具體情況請(qǐng)咨詢)

標(biāo)本的采集及保存

1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

3.尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

標(biāo)本要求:

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

試劑盒組成:

48孔配制:

1.說(shuō)明書(shū):1份

2.封板膜:2片(48)

3.密封袋:1個(gè)

4.酶標(biāo)包被板:1×48 (2-8℃保存)

5.標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)

6.標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)

7.酶標(biāo)試劑:3ml×1瓶(2-8℃保存)

8.樣品稀釋液:3ml×1瓶(2-8℃保存)

9.顯色劑A液:3ml×1瓶(2-8℃保存)

10.顯色劑B液:3ml×1瓶(2-8℃保存)

11.終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)

12.濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)

96孔配置:

1.說(shuō)明書(shū):1份

2.封板膜:2片(96)

3.密封袋: 1個(gè)

4.酶標(biāo)包被板:1×96 (2-8℃保存)

5.標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)

6.標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)

7.酶標(biāo)試劑:3ml×1瓶(2-8℃保存)

8.樣品稀釋液:3ml×1瓶(2-8℃保存)

9.顯色劑A液:3ml×1瓶(2-8℃保存)

10.顯色劑B液:3ml×1瓶(2-8℃保存)

11.終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)

12.濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)

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人14-3-3蛋白eta(YWHAH)elisa試劑盒

需要自備的試劑和器材

1.37℃恒溫箱。

2.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

3.精密移液器及一次性吸頭

4.蒸餾水,

5.一次性試管

6.吸水紙

操作步驟

1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)涸诿笜?biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為9mmol/L,6 mmol/L,3 mmol/L,1.5mmol/L, 0.75 mmol/L)。

2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4、配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7、溫育:操作同3。

8、洗滌:操作同5。

9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

洗板方法

手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

注意事項(xiàng):

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

底物請(qǐng)避光保存。

嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。  

檢測(cè)范圍、 OD值:

具體請(qǐng)咨詢?cè)诰€客服,或者來(lái)電索要詳細(xì)說(shuō)明書(shū)!


人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒


人白細(xì)胞介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒


人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒


人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒


人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒


人鏈激酶(SK)ELISA試劑盒


人丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒


人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒


人蛋白激酶C(PKC)ELISA試劑盒


人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒


人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒


人細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)ELISA試劑盒



























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